RBC裂解液,RBC-1601/RBC-1602 , 適用於(yu) 裂解紅細胞,而不損傷(shang) 其它有核細胞【產(chan) 品簡介】:
ZDGSY生產(chan) 的紅細胞裂解液(RBC Lysis Buffer),是一種用於(yu) 從(cong) 人或動物的血液或組織樣品中裂解或去除紅細胞的溶液。本裂解液經過優(you) 化調整,隻裂解紅細胞而幾乎不損傷(shang) 其它有核細胞。 本產(chan) 品包裝前已經過無菌處理,如紅細胞裂解液處理後的樣品要做細胞培養(yang) 或細胞融合,請在超淨工作台內(nei) 進行整個(ge) 裂解操作過程。
【保存條件】: 4°C保存,一年有效。室溫保存, 3個(ge) 月有效。
【組織細胞樣品操作】:
- 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理後,通過適當方法分散成細胞懸液,離心棄上清。
- 加入3-5倍細胞體積的紅細胞裂解液,混勻,裂解1-2分鍾(本步驟可在室溫或4°C度操作)。
- 10000rpm離心5分鍾,棄紅色上清。(4°C離心效果更佳)。
- 如果發現紅細胞裂解不*,可以重複上述步驟2-3一次,通常微量紅細胞不會影響後續檢測。
- 加入適量PBS、生理鹽水或無血清培養液洗滌細胞(400-500g離心2-3分鍾,棄上清)。
- 可重複第5步1-2次。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉澱體積的5倍,4°C離心效果更佳。
- 根據實驗需求,用適量溶液重懸細胞後即可進行計數等後續實驗。如組織細胞不需要培養等實驗,則洗滌步驟(4-6)可省去。
【血液樣品】:
- 取新鮮抗凝血,加入3-5倍血液體積的紅細胞裂解液,混勻,裂解1-2分鍾(本步驟可在室溫或4度操作,對於鼠的血液,裂解1-2分鍾已經足夠,對於人或牛大型動物的外周血,裂解時間需延長至6-10分鍾,並且裂解過程中要偶爾搖動試管以促進紅細胞裂解(裂解通常不超過15分鍾)。
- 10000rpm離心5分鍾,棄上清(如果發現紅細胞裂解不*,可以重複上述步驟1-3次。如所得BBC是用於核酸提取,則不需重複裂解過程,少量RBC的存在,並不影響下遊實驗,且下列步驟可省去,棄上清後直接加入白血病裂解液即可按照核酸提取步驟操作)。
- 加入5倍細胞體積的PBS、生理鹽水或無血清培養液,重懸有核細胞,10000rpm離心2-3分鍾,棄上清。
- 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉澱後即可進行計數等後續實驗。
- 如所得白血病隻是為提取DNA,則可在室溫下操作;若白血病為提取RNA,在4°C操作效果更佳。