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DNA提取試劑盒是如何從動物組織中提取基因組DNA的

  • 發布日期:2022-03-25      瀏覽次數:1569
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        DNA提取試劑盒是根據氯化芐法構建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯苄具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基苄基化,從而破壞細胞壁的特性。本製品利用了氯苄的這一特性,將植物樣品凍結融解後,再使用PipetTip的端將植物樣品在Microtube壁上數次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統方法相比,省去了液氮研磨等煩瑣步驟,有利於一次性處理大量樣品。而且,本製品經過了改良,熱處理時間隻需15分鍾,使用本製品從實驗開始至水相回收隻需30分鍾時間。得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及限製酶處理等。
        DNA提取試劑盒如何從動物組織中提取基因組DNA:
        使用研缽進行勻漿時:
        ①取1~100mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。
        注)下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
        A.富含DNA酶的胰髒、脾髒、胸腺、淋巴等組織。
        B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
        C.富含角質蛋白的組織或堅硬的組織(如骨骼)等。
        ②加入650μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1,溫和研磨30秒鍾。
        注)使用上述①-注)的實驗材料時,請在加入SolutionA及RNaseA1後,將研缽置於65℃水浴上研磨1分鍾。
        ③收集650μl研磨好的組織勻漿液移至CollectionTube中。如果勻漿體積不足650μl,請補充SolutionA至650μl,65℃保溫5分鍾。
        使用研磨棒進行勻漿時:
        ①取1~100mg的動物組織或人組織移入冰浴預冷的CollectionTube中,用研磨棒快速研磨成糊狀。
        ②加入350μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1後用研磨棒快速研磨成勻漿。
        ③加入350μl的SolutionA將研磨棒上的勻漿衝入CollectionTube中,充分振蕩混合後,65℃保溫5分鍾。