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關於聚合酶的聚合作用有想知道的嗎?

  • 發布日期:2021-09-17      瀏覽次數:1988
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        聚合酶又稱多聚酶。是專門生物催化合成脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一類酶的統稱。1957年,美國科學家阿瑟·科恩伯格(ArthurKornberg)發現。可以識別修飾的NTP,例如生物素標記、高辛標記、熒光素標記的NTP,可以用於各種標記RNA的合成。同時對於T7啟動子有高度的特異性。
        是一種高度特異識別T7啟動子序列的DNA依賴的5'→3'RNA聚合酶。T7RNAPolymerase可以催化單鏈或雙鏈DNAT7啟動子下遊NTP的摻入,合成與T7啟動子下遊的模板DNA互補的RNA。用於RNA合成,合成的RNA可以用於或用作:雜交探針,基因組DNA序列分析,核糖核酸酶保護測定(RNaseprotectionassay),反義RNA合成,作為體外翻譯的RNA模板,RNA剪接研究的底物,RNA二級結構和RNA-蛋白質相互作用,核酸擴增分析,siRNA、miRNA等小RNA。
        聚合酶的聚合作用:
        在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結合位點後,可能使酶的構象發生變化,促進3'-OH與5'-PO4結合生成磷酸二酯鍵。若是錯誤的核苷酸進入結合位點,則不能與模板配對,無法改變酶的構象而被3'-5'外切酶活性位點所識別並切除之。