Taq DNA聚合酶的分類

Taq DNA聚合酶有幾種,除了普通擴增用的Taq DNA聚合酶外，還有以下幾種特意性Taq DNA聚合酶。
a，保真性的一個(ge) 通用標準是錯配率，錯配率越低保真性越好。普通 Taq 酶的錯配率在 10 -5 堿基 / 循環數，而高保真 Taq 酶錯配率可降到 10 -6 數量級，大大降低了出錯的可能性；它適合對 PCR 保真性要求較高的實驗，如基因篩選、測序、突變檢測等等。高保真 Taq 酶的保真原理是：高保真 Taq 酶具有 3‘ 到 5’ 核酸外切酶的活性。目前市麵上主要有兩(liang) 類產(chan) 品：一類是混合型的高保真酶，將帶有 Proofreading 活性的酶與(yu) 普通 Taq 酶（用於(yu) 提高擴增效率）混合起來；另一類是單一型的高保真酶。
b，熱啟動Taq酶（高特異Taq酶）：在 PCR *個(ge) 循環變性之前，有一個(ge) 升溫的過程，引物和模板會(hui) 有一些非特異性配對，如果這時 Taq 酶發揮活性，就很容易產(chan) 生非特異性擴增，由於(yu) 循環初期模板量非常少，產(chan) 生的非特異性條帶經過後麵的指數擴增，就會(hui) 嚴(yan) 重幹擾目的片段的擴增，甚至導致特異性條帶不能擴出；而熱啟動 Taq 酶是必需經過高溫才能激活的酶，因此在初始循環的變性之前它沒有活性，不會(hui) 產(chan) 生非特異性擴增，這就大大提高了 PCR 擴增的特異性。
c，高耐熱Taq酶： 對於(yu) 有些模板變性溫度較高，需要時間較長，可能要求高耐熱性 Taq 酶，如 NEB 公司的 Vent 和 Deep Vent DNA 聚合酶係列，兩(liang) 者都是從(cong) 海底火山口分離出來後克隆的，是普通 Taq 酶耐熱性的三倍以上，前者在 95°C 半衰期近 7 小時， 100°C 近 2 小時；而後者分別為(wei) 23 小時和 8 小時。
d，超長片段擴增Taq酶:對於(yu) 作基因組圖譜、測序及分子遺傳(chuan) 學研究的科研人員，可能會(hui) 用到超長片段的擴增， Clontech 公司的 Advantage Genomic 係列混有 Tth DNA 聚合酶， Proofreading 酶和熱啟動抗體(ti) ，對複雜模板可擴增 10kb 片段，簡單模板可達 40kb 。